kolon ve mide kanserinde 5-aminolevünelik asit aracılı fotodinamik tani
adnan menderes üniversitesi, sağlık bilimleri enstitüsü, 2017
Online
unknown
Zugriff:
Günümüzde kolon ve mide kanserleri tüm kanser türleri içerisinde sık rastlanan kanserlerdendir. Bu kanserlerin erken tanısı için kullanılan yöntemler gerektiği kadar yeterli bilgi vermemektedir. Bu amaçla son zamanlarda fotodinamik tanı yöntemi kullanılmaya başlanmıştır. Bu çalışmada; in-vitro olarak kolon kanseri (HCT116) ve mide kanseri (AGS ve HCT116) hücre hatlarında 5-ALA ile uyarılmış PpIX’ın oluşturduğu flüoresansın teşhisi ile gerçekleştirilen fotodinamik tanının en etkin şekilde yapılması için gerektiği koşulların belirlenmesi amaçlanmıştır. Bu tezde farklı dozlarda 5-ALA (0, 100, 200, 300 μg/ml) uygulanmış HCT116, AGS ve MKN28 hücre hatlarında 0, 1, 2, 3 ve 5 saat inkübasyon süresini takiben hücre canlılığı, flüoresans yoğunluk analizi, hücre göçü ve hareketliliği analizi, kaspaz 3/7 ile erken hücre ölümü analizi, mikroskop ile elde edilen flüoresans görüntülerde görüntü işleme gerçekleştirilmiştir. 200 μg/ml 5-ALA ile uyarılan ve 3 saat inkübe edilen hücrelerde uyarılmadan 3 saat sonra hücre canlılığı açısından karşılaştırıldığında AGS hücre hattının MKN28 ve HCT116 hücre hattına nazaran daha fazla hücre canlılığında azalma olduğu gözlenmiştir. MKN28, HCT116 ve AGS hücre hatlarının farklı inkübe sürelerinde ve 5-ALA konsantrasyonlarında hücreler de farklı flüoresans yoğunlukları gösterilmiştir. En belirgin flüoresans yoğunluğu MKN28 hücre hattında gözlenmiştir. En yüksek hücre hareketinin MKN-28 hücre hattında, en düşük hücre hareketinin ise HCT116 hücre hattında olduğu belirlenmiştir. 300 μg/ml 5-ALA ile uyarılmış HCT116 hücre hattında erken apoptoz bulguları diğer hücre hatları ile karşılaştırıldığında daha belirgin olarak gözlenmiştir. Sonuç olarak, 200 μg/ml 5-ALA ile uyarılan hücrelerde 3 saat sonra gözlenen flüoresansın mide ve kolon kanserlerinin fotodinamik tanı amacıyla kullanılabilecek en uygun tanı dozu olduğu saptanmıştır. İleride yapılacak insan çalışmalarında etkinliği ve duyarlılığı gösterilecek olan fotodinamik tanı, klinikte mide ve kolon kanserleri erken tanısında umut vaat eden bir yöntem olarak uygulanabilecektir. adü bap/TPF-17006 İÇİNDEKİLER KABUL VE ONAY………………………………………………………………………......i TEŞEKKÜR……………………………………………………………………………….....ii İÇİNDEKİLER…………………………………………………………………………..…..iii SİMGELER VE KISALTMALAR DİZİNİ…………………………………………………..v ŞEKİLLER DİZİNİ………………………………………………………………………......vi RESİMLER DİZİNİ………………………………………………………………………....vii TABLOLAR DİZİNİ…………………………………………………………………….....viii ÖZET…………………………………………………………………………………….…..ix ABSTRACT…………………………………………………………………………….……xi 1.GİRİŞ…………………………………………………………………………………….....1 2.GENEL BİLGİLER…………………………………………………………………...…….3 2.1.Kanser……………………………………………………………………....…………..…3 2.2.Kanser Hücrelerinin Özellikleri………………………………………………….….……4 2.3 Kanserin Moleküler Biyolojisi…………………………………………………….….......5 2.4.Mide Kanseri……………………………………………………………………………...5 2.4.1.Mide Kanserinin Patolojisi……………………………………………………..…..…..6 2.5.Kolon Kanseri…………………………………………………………………….….......6 2.5.1. Kolon Kanserinin Patolojisi…………………………………………………..…….….7 2.6. Elektromanyetik Dalgalar……………………………………......................................7 2.7. Jablonski Diyagramı…………………………………………………………….…….....9 2.8. Flüoresans……………………………………………………………………….……...11 2.8.1. Flüoresans Tanı……………………………………………………………………….12 2.8.1.1. Otoflüoresans Tanı Yöntemi………………………………………………………..13 2.8.1.2.Flüoresans Tanı……………………………………...………………………………13 2.9. Fotosensitif Ajanlar……………………………………………………………………..14 2.9.1. 5-Aminolevünelik Asit …………………………………………………..…………...16 2.9.2. Hexaaminolüvenilik asit………………………………………………….…………...18 2.10. Fotodinamik Tanıda Işık Kaynakları……………………………………….………….19 2.11. Fotodinamik Tanı Klinikte Kullanımı……………………………………….………...20 2.12. İmage J……………………………………………………………………….………...21 2.13. Matlab……………………………………………………………………….…………23 3.GEREÇ VE YÖNTEMLER……………………………………………………………….24 3.1.Gereç………………………………………………………………………..……………24 3.2.Yöntem………………………………………………………………………..…………25 3.2.1.Hücre Hatlarının Ekimi ve Çoğaltılması………………………………………………25 3.2.2.Hücre Sayımı…………………………………………………………………………..26 3.2.3. 5-Aminolevünelik Asit Stok Solüsyonun Hazırlanışı…………………………………26 3.2.4.İn-Vitro Fotodinamik Tanı Deneyi…………………………………………………….26 3.2.5.Hücre Görüntülenmesi…………………………………………………………….......27 3.2.6.Hücre Canlılığının Değerlendirilmesi……………………………………………….…28 3.2.7.Erken Apoptosis Analizi………………………………………………………….……28 3.2.8.Hücre Göçü……………………………………………………………………….……28 3.2.9.Hücrelerin Bulunduğu Alanları Saptamak………………………………………….….29 3.2.10. Hücre Flüoresans Yoğunlukları………………………………………………….…..30 3.2.11. Hücre Hareketlerinin Değerlendirilmesi………………………………………….….31 3.2.12. İstatistiksel Analiz………………………………………………………………....…32 4. BULGULAR………………………………………………………………………….…...33 4.1.Mikroskop Görüntüleri………………………………………………………………..…34 4.2.Hücre Hatlarının Hareketlerinin Analizi……………………………………………...…37 4.3.Hücre Canlılığının Analizi…………………………………………………………..…..38 4.4.Erken Apoptoz Analizi………………………………………………………………..…39 4.5.5-Aminolevünelik Asit ile İndüklenmiş Hücrelerin Flüoresans Yoğunlukları……..…..40 5.TARTIŞMA………………………………………………………………………………..43 6.SONUÇ VE ÖNERİLER…………………………………………………………………..47 KAYNAKLAR………………………………………………………………………………49 ÖZGEÇMİŞ………………………………………………………………………………….55
Titel: |
kolon ve mide kanserinde 5-aminolevünelik asit aracılı fotodinamik tani
|
---|---|
Autor/in / Beteiligte Person: | ünay, simge ; BİLGİN, mehmet dinçer ; adnan menderes üniversitesi, sağlık bilimleri enstitüsü, büyofizik anabilimdalı |
Link: | |
Veröffentlichung: | adnan menderes üniversitesi, sağlık bilimleri enstitüsü, 2017 |
Medientyp: | unknown |
Schlagwort: |
|
Sonstiges: |
|