Presence of porphyromonas gulae and anti-ppad/p. Gulae antibodies in patients with rheumatoid arthritis are not associated with exogenous citrullation or disease activity

Introducción: P. gulae es un microorganismo Gram negativo de la familia Porphyromonadaceae. Es de metabolismo asacarolítico y de crecimiento anaeróbico obligado. Presenta en su estructura factores de virulencia similares a P. gingivalis como la presencia de Lipopolisacárido (LPS), proteasas muy similares a las gingipaínas y enzima PAD (Peptidil arginina deiminasa). Una enzima encargada de catalizar la citrulinación, una modificación postraduccional fisiológica, relacionada con la formación de anticuerpos y autoanticuerpos anti péptidos citrulinados, que son importantes en la fisiopatología de la Artritis Reumatoide (AR) y la periodontitis. Objetivo: Evaluar presencia de P. gulae y de anticuerpos anti péptidos citrulinados de PAD de P. gulae en pacientes con AR y su posible asociación con marcadores clínicos de actividad. Metodología: Se incluyeron 95 pacientes con AR y 95 controles pareados por edad y sexo. Se midieron los niveles séricos de marcadores reumatológicos como velocidad de sedimentación globular (VSG), proteína C reactiva (PCR), anticuerpos anti-proteína citrulinada (Anti-CCp/ACPA) y factor reumatoide (FR). La actividad de la enfermedad se evaluó mediante índices de actividad de la enfermedad-28 (DAS28) y SCDAI. El diagnóstico periodontal se estableció de acuerdo con los criterios de la Academia Americana de Periodoncia y el Centro para el Control y la Prevención de Enfermedades. la presencia de P. gulae y P. gingivalis se estableció mediante qPCR, la presencia de anticuerpos anti péptidos citrulinados de PAD de P. gulae (DDK-cit y LPK-cit) se determinó mediante ensayo de ELISA in-house. Se hicieron asociaciones con datos clínicos mediante las pruebas estadísticas Kruskal Wallis, U de Mann Whitney y Análisis discriminante de correspondencias múltiples en el software SPSS V24 y STATA para Windows, con una significancia del 95% (p≤ 0.05). Resultados: Se observó una frecuencia de P. gulae en el grupo de AR de 15.8% frente a controles de 9,5%, p=0,1925, sin asociarse con actividad clínica articular ni diagnóstico de periodontitis. De los 180 individuos evaluados, 17 tuvieron presencia de anticuerpos anti-péptidos citrulinados de PAD de P. gulae. A pesar de una mayor frecuencia en el grupo de AR para VDK-cit y anti LPQ-cit9 de PPAD frente al grupo control (38% y 49%,) y (24% y 42%, respectivamente), los resultados no fueron significativos (p=0.378 y p=0,346) no se evidencio relación con actividad o marcadores de la enfermedad en AR. Conclusión: A pesar de la presencia de P. gulae y anticuerpos anti péptido citrulinados de PPAD de P. gulae en pacientes con AR, no fue posible establecer la relación con las variables clínicas, lo cual podría indicar un aporte menor de este microorganismo al mecanismo biológico y molecular de la citrulinación común entre AR y periodontitis. Por consiguiente, la presencia de P. gingivalis sigue contribuyendo de manera importante al incremento de anticuerpos anti proteínas/péptidos citrulinados a partir de fuentes exógenas de citrulinación en pacientes con diagnóstico de AR y periodontitis. Palabras clave: P. gulae, artritis reumatoide, periodontitis, anticuerpos. MinCiencias Magíster en Ciencias Básicas Biomédicas Maestría Introduction: P. gulae is a Gram negative microorganism of the Porphyromonadaceae family. It is of asacarolytic metabolism and forced anaerobic growth. It has virulence factors similar to P. gingivalis in its structure, such as the presence of Lipopolysaccharide (LPS), proteases very similar to gingipains, and the PAD enzyme (Peptidyl arginine deiminase). An enzyme responsible for catalyzing citrullination, a physiological post-translational modification, related to the formation of anti-citrullinated peptide antibodies and autoantibodies, which are important in the pathophysiology of Rheumatoid Arthritis (RA) and periodontitis. Aim: To evaluate the presence of P. gulae and anti-citrullinated peptides of PAD of P. gulae in patients with RA and their possible association with clinical markers of activity. Methodology: 95 patients with RA and 95 controls matched by age and sex were included. The serum levels of rheumatological markers such as erythrocyte sedimentation rate (ESR), C-reactive protein (CRP), anti-citrullinated protein antibodies (Anti-CCp / ACPA) and rheumatoid factor (RF) were measured. Disease activity was assessed by disease activity indices-28 (DAS28) and SCDAI. Periodontal diagnosis was established according to the criteria of the American Academy of Periodontology and the Center for Disease Control and Prevention. the presence of P. gulae and P. gingivalis was established by qPCR, the presence of anti-citrullinated peptides of P. gulae PAD (DDK-cit and LPK-cit) was determined by in-house ELISA assay. Associations with clinical data were made using the Kruskal Wallis, Mann Whitney U statistical tests, and Multiple Correspondence Discriminant Analysis in SPSS V24 and STATA software for Windows, with a significance of 95% (p≤ 0.05). Results: A frequency of P. gulae was observed in the RA group of 15.8% compared to 9.5% controls, p = 0.1925, without being associated with joint clinical activity or diagnosis of periodontitis. Of the 180 individuals evaluated, 17 had the presence of anti-citrullinated peptides of PAD from P. gulae. Despite a higher frequency in the RA group for VDK-cit and anti-LPQ-cit9 of PPAD compared to the control group (38% and 49%,) and (24% and 42%, respectively), the results were not significant. (p = 0.378 and p = 0.346) there was no evidence of a relationship with activity or disease markers in RA. Conclusion: Despite the presence of P. gulae and anti-citrullinated peptide PPAD antibodies of P. gulae in patients with RA, it was not possible to establish the relationship with the clinical variables, which could indicate a lower contribution of this microorganism to the mechanism. Biological and molecular of the common citrullination between RA and periodontitis. Consequently, the presence of P. gingivalis continues to contribute significantly to the increase in anti-citrullinated proteins / peptides antibodies from exogenous sources of citrullination in patients diagnosed with RA and periodontitis. Keywords: P. gulae, rheumatoid arthritis, periodontitis, antibodies