Efeitos antibiofilme e citotóxico de um novo nanosistema carreador de clorexidina e fluconazol

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) ; Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) ; Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) ; CNPq: 404721/2016-8 ; Processo FAPESP: 2017/24416-2 ; CAPES: 001 ; Pós-graduação em Ciência Odontológica - FOA ; Os objetivos do presente estudo foram montar e caracterizar um novo nanocarreador dual de clorexidina (CLX) e fluconazol (FLZ), bem como avaliar seu efeito sobre biofilmes microcosmos e sua citotoxicidade sobre queratinócitos orais. Para montar o nanocarreador dual, CLX e FLZ foram adicionados a nanopartículas de óxido de ferro (NPsOF) previamente revestidas por quitosana (QTS), seguido de um processo de solubilização sob agitação magnética. O nanocarreador foi, então, caracterizado por microscopia eletrônica de transmissão, difração de raios X, espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier e análise termogravimétrica. A suscetibilidade de Candida albicans e Candida glabrata no estado planctônico ao nanocarreador dual foi determinada pelos valores de concentração inibitória mínima, utilizando o método da microdiluição em caldo. Um pool de saliva de 2 doadores saudáveis suplementado com espécies de Candida foi usado como inóculo para a formação de biofilmes microcosmos. Os biofilmes foram cultivados (72 h) sobre discos de vidro posicionados no Amsterdam Active Attachment model e tratados (24 h) com NPsOF-QTS carreando 39 μg/mL de CLX + 156 μg/mL de FLZ (NPsOF-QTS-CLX39-FLZ156), 78 μg/mL de CLX + 312 μg/mL de FLZ (NPsOF-QTS-CLX78-FLZ312) e 156 μg/mL de CLX + 624 μg/mL de FLZ (NPsOF-QTS-CLX156-FLZ624). NPsOF (218,5 μg/mL), QTS (218,5 μg/mL) e 156 μg/mL de CLX + 624 μg/mL de FLZ (CLX156-FLZ624) foram testados como controles. Posteriormente, foram realizadas as análises de quantificação das unidades formadoras de colônias (UFCs), produção de ácido lático (LA), composição da matriz extracelular (ME) e viabilidade celular por microscopia confocal de varredura a laser (MCVL). Para o ensaio de ...