Activitat desnitrificant de fraccions cel·lulars de Pseudomonas stutzeri utilitzada en tasques de bioneteja en pintura mural ; Actividad desnitrificante de fracciones celulares de Pseudomonas stutzeri utilizada en labores de biolimpieza en pintura mural.

[CA] En els últims anys, s'ha investigat i treballat a la utilització d'aplicacions biotecnològiques per a la restauració d'obres d'art, particularment en la neteja de pintures murals amb l'aplicació d'aquests bacteris vius, el que s'ha denominat bioneteja en els treballs de conservació de pintura mural. En el Laboratori de Microbiologia de la UPV s'ha desenvolupat aquesta tècnica i s'ha aplicat a les pintures murals de les esglésies de Sant Nicolau i dels Sants Joans de València, utilitzant Pseudomonas stutzeri per a l'eliminació de crostes de nitrats insolubles, obtenint-se resultats espectaculars. No obstant això, l'ús de bacteris vius limita molt la tècnica i els treballs en els quals es pot aplicar, per tant, es considera interessant investigar si és possible utilitzar els bacteris inactius o una fracció d'ells i que es conserve l'activitat desnitrificant. Una vegada identificada la capacitat desnitrificant del cep aïllat, que implica un primer pas de reducció de nitrat a nitrit mitjançant l'acció de una nitrat reductasa, es procedeix a la identificació i caracterització d'aquesta activitat enzimàtica. Per a això, s'estudia la possibilitat de realitzar extractes enzimàtics a partir dels cultius bacterians, estudiant l'efectivitat de diferents mètodes de disrupció cel·lular descrits a la bibliografia (ruptura per ultrasons, ús de detergents, ús de cicles de congelació/descongelació) amb l'objectiu d'obtenir un lisat cel·lular que continga l'activitat nitrat reductasa. S'investiga la compartimentalització de la dita activitat mitjançant fraccionament subcel·lular utilitzant diferents estratègies. Del lisat total (TL) s'obtindrà la fracció periplasmàtica i citosòlica (CPP) i la fracció membranosa total (TM), la qual pot dividir-se en les seues corresponents fraccions de membrana externa i interna. A més a més, s'investiga bibliogràficament la possibilitat que aquesta activitat siga part del proteoma periplasmàtic, estudiant la preparació selectiva de proteïnes periplasmàtiques mitjançant diferents ...