Evolución de la virulencia del fitopatógeno Xanthomonas arboricola pv. juglandis por efecto de bacteriófagos: un aspecto relevante en el desarrollo de fagoterapia como alternativa de control.

RESULTADOS OBTENIDOS: Para cada uno de los objetivos específicos, describa o resuma los resultados. Relacione las publicaciones y /o manuscritos enviados a publicación con los objetivos específicos. En la sección Anexos incluya información adicional que considere pertinente para efectos de la evaluación. La extensión máxima de esta sección es de 5 páginas (letra tamaño 10, Arial o Verdana). El objetivo general del proyecto fue evaluar cambios en los patrones de virulencia asociados al metabolismo del hierro en variantes fago-resistentes de Xanthomonas arboricola pv. juglandis (Xaj). Para ello se propusieron 3 objetivos específicos: 1. Seleccionar variantes fago-resistentes de Xaj (XajF-R) y construir una mutante atenuada del mismo patógeno mediante la deleción en el regulador transcripcional fur (Xaj-Δfur). El proyecto se enfoco inicialmente en obtener variantes fago-resistentes del aislado J303 de Xaj a partir del bacteriófago f30-Xaj, para luego ser caracterizados a partir de un enfoque polifásico. Dos variantes fenotípicas de resistencia al fago f30-Xaj fueron detectados a partir Xaj J303 empleada como referencia, debido a la previa secuenciación y anotación de su genoma. Estas variantes se reconocen por desarrollar colonias grandes (BG) y colonias pequeñas (SmC) (Figura 1A-B), con una frecuencia de aparición de 3,4 x 10-6 y 2,07 x10-7 UFC/mL, respectivamente. Ambos fenotipos resistentes presentan resistencia cruzada con otros bacteriófagos previamente reportados contra Xaj J303, tales como f20-Xaj y f29-Xaj. En cultivos líquidos la variante SmC crece formando agregados que precipitan a lo largo del tiempo (Figura 1C). Ambos fenotipos presentan un retardo de las primeras etapas de crecimiento in batch (fase lag), respecto de la cepa parental (Figura 1E) haciendo referencia a una baja en el fitness de las cepas analizadas generadas por la presión de bacteriófagos. Más aún, se puede evidenciar diferencias en el perfil de proteínas de membranas externas (OMPs) y estructura de los lipopolisacáridos de membrana ...