Apoptose em macr??fagos induzida por nanoc??psulas com n??cleo lip??dico (LNC) carregadas com diclofenaco ; Apoptosis in macrophages induced by diclofenac-loaded lipid core nanocapsules (LNC)

O Diclofenaco ?? uma droga anti-inflamat??ria n??o esteroide (AINE), utilizada no tratamento de afec????es inflamat??rias musculoesquel??ticas, incluindo as doen??as autoimunes como a Artrite Reumatoide (AR). Na sinovite cr??nica da AR os macr??fagos exercem papel central na inflama????o e a indu????o de apoptose destas c??lulas pode vir a representar um papel central no tratamento. Neste trabalho, utilizou-se de uma formula????o de diclofenaco carregada em nanoc??psulas de n??cleo lip??dico (LNC-DIC), avaliando-se o papel desta formula????o na indu????o de apoptose em macr??fagos. A LNC foi formada a partir de um n??cleo organogel, revestido com uma parede polim??rica poly(e- caprolactona) e estabilizada com polyssorbato 80, obtendo di??metro D[4,3] de 243nm para DIC e 319nm para LNC-DIC. Dessa forma foram utilizadas as formula????es Diclofenaco (DIC), LNC-DIC e apenas LNC em macr??fagos humanos (THP-1) e Murinos (J774). A IC50% para toxicidade em macr??fagos para as formula????es foi 646??M para DIC e 144,5??M para LNC-DIC em THP-1 e 251,7??M para DIC e 24,35??M para LNC-DIC em J774. A formula????o LNC-DIC reduziu acentuadamente o potencial de membrana mitocondrial em rela????o a DIC (-44,65??3,36 e 21,79??2,19, p<0,0001, respectivamente) em THP-1, al??m de J774 (-5,65??0,88 e -26,59??7,21, p<0,0001). Tamb??m houve maior produ????o de ROS intracelular para LNC-DIC em rela????o a DIC na linhagem THP-1 (27,24??0,90 e 36,88??2,49, p=0,0002). A formula????o LNC-DIC aumentou o percentual de c??lulas com caspase-3 ativa comparada ?? DIC (53,08??6,23 e 81,70??9,09, p=0,0007) e a atividade de caspase-3 nas concentra????es estudadas. Al??m disso, LNC-DIC induziu maior percentual de c??lulas Anexina V+ comparada a DIC (6,26??0,34 e 12,68??0,22, p=0,0001). Quando avaliado o ??ndice de dano ao DNA pelo ensaio cometa, n??o houve diferen??a entre as formula????es testadas DIC e LNC-DIC (44,24??2,65 e 53,33??4,16, p=0,586). Tomados em conjunto, esses resultados demonstram que a formula????o nanoencapsulada LNC-DIC tem ...