Analyse protéomique des couches interne et externe de la membrane vitelline de l’œuf de poule (Gallus gallus)

National audience ; La membrane vitelline (MV) de l’œuf de poule, située à l’interface entre le blanc et le jaune, est constituée de deux couches de protéines : la couche interne en contact avec le jaune, synthétisée dans l’ovaire au cours de la folliculogenèse, et la couche externe en contact avec le blanc, secrétée dans l’oviducte après l’ovulation du follicule mature. La MV a un rôle majeur dans la fécondation, l’embryogenèse et la protection de l’embryon. Près de 140 protéines différentes composent la MV, cependant la répartition de ces protéines dans les 2 couches de la membrane et leur(s) rôle(s) physiologique(s) respectifs restent pour la plupart inconnus. L’objectif de cette étude est donc d’identifier, inventorier et comparer les protéines des deux couches de la membrane vitelline afin de mieux comprendre la structure de cette membrane et préciser les fonctions biologiques associées. Ce travail a nécessité dans un premier temps la mise au point de la séparation des membranes vitellines interne et externe et des conditions d’extraction des protéines de ces dernières pour l’analyse par SDS-PAGE et par spectrométrie de masse. Les premiers résultats montre que les profils protéiques des deux couches de la membrane vitelline sont très différents. L’analyse protéomique des deux membranes par spectrométrie de masse (en cours) sera complétée par une annotation fonctionnelle des protéines. Ces données permettront d’établir une liste de gènes candidats dont l’expression dans différents tissus reproducteurs de la poule pondeuse sera étudiée par RT-qPCR, afin de préciser la spécificité et lieu de synthèse de ces protéines.