Extraction et purification de l'exo-P-(1-3)-glucanase du suc digestif d'escargot (Helix pomatia). Étude de la protoplastisation sur Saccharomyces cerevisiae / Extraction and purification of exo-β-(1,3)-glucanase from snail (Helix pomatia) digestive juice. Protoplastization of Saccharomyces cerevisiae

L'extraction et la purification de la β-(1,3)-glucanase du suc d'Helix pomatia par précipitation au sulfate d'ammonium 25, 40, 60 et 80% montre que la fraction 40% présente une meilleure activité spécifique 17U/mg avec un rendement de 24,40%, L'élution chromatographique de la fraction -40% indique que les éluats compris entre les tubes 25 et 31 constituent un seul pic avec un maximum d'activité spécifique à 104 U/mg. Ces éluats rassemblés forme la fraction dite '25-31' avec une activité spécifique de 161 U/mg et un rendement de 2%. L'étude comparative de la protoplastisation de la levure Saccharomyces cerevisiae avec la cytohélicase commerciale et la préparation enzymatique obtenue a été réalisée avec et sans prétraitement au mercapto-éthanol. Les rendements sans prétraitement s'avèrent dans les deux cas trop faibles, par contre les rendements obtenus avec un prétraitement sont de 83 et 80% respectivement avec la cytohélicase commerciale et l'extrait enzymatique. Par ailleurs, les taux de protoplastisation pourraient être améliorés en utilisant des cellules en phase de croissance de 15 heures de culture et avec une concentration d'enzyme égale à 0,022mg/ml.