Lactobacillus reuteri ATCC 53608 mdh gene cloning and recombinant mannitol dehydrogenase characterization

SASAKI, Yoshiharu ; LAIVENIEKS, Maris ; et al.

In: Applied microbiology and biotechnology, Jg. 68 (2005), Heft 1, S. 36-41

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A gene encoding mannitol-2-dehydrogenase (E.C. 1.1.1.138) (MDH) was cloned from Lactobacillus reuteri and expressed in Escherichia coli. The 1,008-bp gene encodes a protein consisting of 336 amino acids, with a predicted molecular mass of 35,920 Da. The deduced amino acid sequence of L. reuteri MDH (LRMDH) is 77% and 76% similar to the MDHs from Leuconostoc mesenteroides and Leuconostoc pseudomesenteroides, respectively. The purified recombinant enzyme appears as a single band of 40 kDa in sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, but gel filtration indicates that the native enzyme is a dimer. The optimum temperature for the recombinant enzyme is 37°C, the pH optima for D-fructose reduction and D-mannitol oxidation are 5.4 and 6.2, respectively. The Km values for NAD (9 mM) and NADH (0.24 mM) are significantly higher than those for NADP (0.35 mM) and NADPH (0.04 mM). The Km values of LRMDH for D-fructose and D-mannitol are 34 mM and 54 mM, respectively. Contrary to what the enzyme sequence suggests, recombinant LRMDH contains a single catalytic zinc per subunit.

Titel:	Lactobacillus reuteri ATCC 53608 mdh gene cloning and recombinant mannitol dehydrogenase characterization
Autor/in / Beteiligte Person:	SASAKI, Yoshiharu ; LAIVENIEKS, Maris ; ZEIKUS, J. Gregory
Link:	Volltext (PDF) View record from PASCAL Archive
Zeitschrift:	Applied microbiology and biotechnology, Jg. 68 (2005), Heft 1, S. 36-41
Veröffentlichung:	Berlin: Springer, 2005
Medientyp:	academicJournal
Umfang:	print, 27 ref
ISSN:	0175-7598 (print)
Schlagwort:	Biotechnology Biotechnologies Microbiology, infectious diseases Microbiologie, maladies infectieuses Sciences biologiques et medicales Biological and medical sciences Sciences biologiques fondamentales et appliquees. Psychologie Fundamental and applied biological sciences. Psychology Biotechnologie Recherche fondamentale orientée Mission oriented research Biologie des microorganismes d'intérêt industriel confirmé ou potentiel Biology of microorganisms of confirmed or potential industrial interest Divers Miscellaneous Bactérie lactique Lactic acid bacteria Bacteria láctica Bactérie Bacteria Enzyme Enzima Lactobacillaceae Oxidoreductases Caractérisation Characterization Caracterización Clonage moléculaire Molecular cloning Clonación molecular Lactobacillus Mannitol 2-dehydrogenase (NADP+) Protéine recombinante Recombinant protein Proteína recombinante Gène mdh Lactobacillus reuteri
Sonstiges:	Nachgewiesen in: PASCAL Archive Sprachen: English Original Material: INIST-CNRS Document Type: Article File Description: text Language: English Author Affiliations: Department of Biochemistry and Molecular Biology, Michigan State University, East Lansing, MI, 48824, United States ; Department of Microbiological Engineering, Sojo University, 4-22-1 Ikeda, Kumamoto, Japan Rights: Copyright 2005 INIST-CNRS ; CC BY 4.0 ; Sauf mention contraire ci-dessus, le contenu de cette notice bibliographique peut être utilisé dans le cadre d’une licence CC BY 4.0 Inist-CNRS / Unless otherwise stated above, the content of this bibliographic record may be used under a CC BY 4.0 licence by Inist-CNRS / A menos que se haya señalado antes, el contenido de este registro bibliográfico puede ser utilizado al amparo de una licencia CC BY 4.0 Inist-CNRS Notes: Biotechnology

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