Estudio de la reconstitución de las poblaciones hematopoyéticas en el trasplante xenogénico de médula ósea en ratones NOD/SCID

1,- El cultivo de SCSP en presencia de IL3 + IL6, TPO + SCF + FL y TPO + SCF + FL + IL3 + IL6 produce una expansión significativa de células nucleadas totales, células CD34+ y CFCs. Esta expansión es significativamente superior con combinación de las cinco citocinas testadas. 2,- En cultivos iniciados con FL como citocina única sólo un pequeño porcentaje de células CD34+ de sangre periférica experimenta división celular, mientras que TPO y SCF de manera individual promueven la división celular de 68% y 65% de las SCSP respectivamente. 3,- TPO, SCF y FL actúan de manera sinérgica in vitro en la estimación de la división celular de SCSP que se produce en un 91% de las células CD34+. Este efecto sinérgico se ve ligeramente incrementado con la adición de IL3 + IL6. 4,- La frecuencia de progenitores LTC-IC en células post-mitóticas CD34+PKH26- de SP se incrementa un promedio de 12 veces en los cultivos con TPO + SCF + FL y de 4 veces en aquellos establecidos en presencia de TPO + SCF + FL + IL3 + IL6. 5,- Las características inmunofenotípicas de células CD34+ generadas de novo in vitro son similares tras cultivo con TPO + SCF + FL y TPO + SCF + FL + IL3 + IL6, mostrando una disminución porcentual de los fenotipos más primitivos en relación a las células antes de cultivo independientemente de las citocinas utilizadas. 6,- El porcentaje de células en fase G0/G1 del ciclo celular disminuye significativamente tras el cultivo in vitro de CD34+ de SP, con respecto a la situación basal. Esta disminución es similar en cultivos con TPO + SCF + FL y en aquellos en los que además se añadió IL3 + IL6. 7,- Las células CD34+ generadas de novo en cultivos con TPO + SCF + FL mantienen la capacidad de prendimiento en ratones NOD/SCID a niveles similares a células no expandidas. El prendimiento humano es multilineal como se demuestra por la presencia de células progenitoras mieloides y linfoides B en médula ósea y bazo de los ratones. 8,- La adición de IL3 + IL6 a la combinación de TPO + SCF + FL inhibe completamente la capacidad de prendimiento de las células generadas de novo en los cultivos.